Несмотря на многочисленные исследования большого количества различных веществ в качестве гепатопротекторов клиника до настоящего времени не располагает необходимым арсеналом терапевтических средств для профилактики и лечения данной патологии. В связи с этим, наиболее перспективным направлением следует считать разработку новых высокоэффективных препаратов из природного сырья, в том числе, фитопрепаратов, и обоснование их клинического применения. Однако, решение целого ряда вопросов патогенеза заболеваний печени невозможно в условиях клиники и требует создания адекватной экспериментальной модели на животных.

Для воспроизведения различных форм патологии печени используется четыреххлористый углерод (CCl4) [1,2]. Введение животным этого соединения позволяет вызвать различные патологические состояния печени – от острого и хронического гепатита до цирроза печени различной степени выраженности.

Целью работы явилось создание модели токсического гепатита и изучение гепатопротекторного и лечебного действия препарата гепатофил при токсическом поражении печени.

На модели острого токсического гепатита, вызванного с помощью введения под кожу 50% маслянного раствора CCl4 в объеме 0,5 мл/100 г массы тела 1 раз в сутки в течение 7 дней и при курсовом введении (30 дней), изучено лечебное действие гепатофила в дозе 0,3 г/кг.

Наблюдениями установлено, что гепатофил при интоксикации CCl4 повышает выносливость организма животных и облегчает течение патологического процесса.

Так, внешние признаки интоксикации более четко проявлялись у животных, которым гепатофил не вводился. У них на второй день после введения CCl4 отмечалась вялость, адинамия, нежелание принимать пищу, потеря веса и др. В дальнейшем симптомы интоксикации постепенно нарастали и достигали своего максимума к 5 дню, а затем они постепенно убывали. У животных опытной группы, которым вводился препарат одновременно с началом затравки CCl4, явления интоксикации наступали несколько позже (на 4 – 5 день) и были менее выраженными.

Одновременно с улучшением показателей, характеризующих общую реакцию организма при токсическом гепатите, гепатофил оказывает положительное влияние на изменение некоторых морфологических и биохимических показателей крови (табл. 1).

Установлено, что у животных с токсическим гепатитом контрольной группы на 7 сутки опыта заметно повышалось количество лейкоцитов переферической крови – до (11,98±1,66)х109/л с одновременным увеличением содержания лимфоцитов – до (68,6±4,6)%. В отличие от этого у животных опытной группы, которым вводился препарат, каких-либо изменений в содержании этих показателей не выявлено (количество лейкоцитов – (6,95±0,71)х109/л), количество лимфоцитов – (54,0±8,3)%, что соответствует показателям  здоровых животных.

Содержание гемоглобина, эритроцитов и СОЭ, изменилось незначительно в обеих группах животных.

Таблица 1 – Изменение некоторых биохимических показателей сыворотки крови белых крыс в динамике лечения токсического гепатита гепатофилом

Группа	Срок дней	Доза препарата	Лейкоциты 109/л	Показатель
				АЛТ ммоль/ч.л.	АСТ ммоль/ч.л.	ЩФ ммоль/ч.л.	Белковый коэф-фициент	Холесте-рин ммоль/л	Желчные кислоты ммоль/л	b-липопро-теиды, ед.
Токсический гепатит	7	вода	11,98±1,66	2,3±0,2	1,2±0,2	15,8±1,5	0,93±0,15	0,93±0,15	0,20±0,02	26,0±3,2
CCl4+гепато-фил		300 мг/кг	6,95±1,70	2,14±0,1	1,3±0,2	5,7±1,0	0,41±0,03	1,49±0,29	0,23±0,02	27,0±1,5
Токсический гепатит	14	вода	9,34±0,73	0,84±0,1	1,1±0,14	11,8±2,3	0,36±0,03	0,83±0,04	0,19±0,01	192,0±11,2
CCl4+гепато-фил		300 мг/кг	7,68±1,65	0,8±0,1	0,96±0,1	1,29±1,7	0,42±0,02	1,31±0,29	0,21±0,03	124,0±16,2
Токсический гепатит	30	вода	7,55±1,12	1,5±0,2	1,7±0,1	11,1±1,7	1,51±0,04	1,51±0,15	0,38±0,03	109,0±12,9
CCl4+гепато-фил		300 мг/кг	6,14±0,83	1,0±0,1	1,5±0,14	7,0±1,3	0,58±0,07	1,45±0,81	0,33±0,03	81,0±13,2
Интактные животные		–	6,82±1,14	0,9±0,1	1,36±0,1	9,46±2,5	0,57±0,04	1,84±0,16	0,19±0,04	10,0±1,35

У животных контрольной группы угнеталась белковообразующая функция печени, о чем свидетельствовало снижение содержания общего белка до (52,35±0,7) г/л в основном за счет снижения грубодисперсной части белка (a-1 и a-2 глобулинов, соответственно, до 13,2% и 13,4%). У животных опытной группы эти изменения были менее выражены. Количество общего белка удерживалось в пределах исходного состояния (56,3±5,0) г/л, а уровень a-1 и a-2 глобулинов был гораздо выше, чем у животных с токсическим гепатитом без введения препарата (28,9% и 16,6%, соответственно).

Повышение активности ферментов, характеризующих повреждение структуры печеночной клетки (АЛТ, АСТ, альдолаза) происходило однонаправленно в обеих группах животных, существенного различия между группами не наблюдалось. В равной мере снижалась активность неспецифической холинэстеразы, что свидетельствует о нарушении функции клеток печени. В то же время активность щелочной фосфатазы у животных опытной группы оставалась в пределах нормальных величин – (5,7±1,0) мкмоль/ч.л., тогда как у животных контрольной группы она возрастала в 2,8 раза до (15,8±1,5) мкмоль/ч.л., что может свидетельствовать об ухудшении оттока желчи. Следовательно, гепатофил способствует улучшению оттока желчи, что очень важно при  данных условиях. В эти же сроки у животных контрольной группы был значительно снижен холестерин сыворотки крови: с (1,84±0,16) до (0,93±0,15) ммоль/л, что, по-видимому, являлось следствием глубокого повреждения гепатоцитов. У животных опытной группы содержание холестерина изменялось по сравнению с группой интактных животных несущественно.

Не было выявлено заметных изменений в содержании желчных кислот, b-липопротеидов сыворотки крови.

Курсовое введение испытуемого препарата в течение 30 дней животным с токсическим гепатитом способствовало полному восстановлению большинства исследуемых показателей к исходному уровню, тогда как у животных, не получавших препарат, отдельные показатели не восстанавливались.

Заметных различий со стороны содержания общего белка между группами не наблюдалось. Его уровень удерживался в пределах исходного состояния. Однако, белковые фракции изменялись более заметно в условиях токсического гепатита без введения препарата. Если у этих животных количество альбумина составило (30,0±2,1)%, то у животных, которым вводился гепатофил – (36,4±2,6)%. В то же время содержание грубодисперсной части белка – глобулинов было снижено, что может свидетельствовать об усилении белковообразующей функции печени. Как следует из таблицы 1, улучшались такие показатели как холестерин, b-липопротеиды, желчные кислоты.

Проведенное нами изучение ряда ферментов в крови показало, что введение раствора гепатофила в условиях токсического гепатита в определенной степени нормализует их активность, тогда как активность ферментов у животных с токсическим гепатитом без введения препарата была выше и составила соответственно (1,2±0,2) мкмоль/ч.л. против (0,94±0,16) мкмоль/ч.л. для альдолазы; (1,5±0,2) мкмоль/ч.л. против (1,00±0,14) мкмоль/ч.л. для АЛТ; (1,7±0,1) мкмоль/ч.л. против (1,6±0,9) мкмоль/ч.л. для АСТ; (11,07±1,66) мкмоль/ч.л. против (7,02±1,34) мкмоль/ч.л. для щелочной фосфатазы.

При этом количество билирубина у животных опытной группы составило (35,3±44,3) мкмоль/л, а у контрольных – (45,7±6,0) мкмоль/л, количество холестерина, соответственно (1,45±0,31) ммоль/л и (1,5±0,15) ммоль/л, содержание b-липопротеидов (84,0±13,2) ед. и (109,0±12,9) ед.

О тяжести патологического процесса в печени могут говорить изменения некоторых биохимических показателей гомогенатов ткани печени (табл. 2).

Таблица 2 – Изменение некоторых биохимических показателей в гомогенате печени крыс в динамике лечения токсического гепатита гепатофилом

Группа	Гомогенат ткани печени
	белок, мг/1 г ткани	оксипро-лин, мкмоль/мг белка	гексоз-амины, ммоль/мг белка	МДА, ммоль/мг белка
Интактные	73±4,65	15,3±4,1	89±5,46	0,21±0,04
Токсический гепатит 7 дн.	64±8,29	34,2±2,2	210±17,2	0,41±0,02
Токсический гепатит 7 дн. + гепатофил	99,4±6,37	15,6±1,2	163±15,7	0,15±0,02
Токсический гепатит 14 дн.	53,8±4,9	26,6±2,4	168±13,1	0,22±0,06
Токсический гепатит 14 дн. + гепатофил	63,6±1,75	21,7±4,8	164±15,8	0,26±0,01
Токсический гепатит 30 дн.	68,5±13,5	20,0±2,7	469±35,7	0,14±0,01
Токсический гепатит 30 дн. + гепатофил	74,2±8,8	11,7±0,8	425±2,6	0,15±0,02

Повышение содержания гексозаминов в гомогенате ткани печени через 7 дней после начала введения CCl4 и в последующие сроки – через 14 дней и, особенно, через 30 дней, которое более выражено в контрольной группе, указывает на развитие некробиотического процесса гепатоцитов и наличие воспалительного процесса экссудата.

Существенное различие между группами выявлено в изменении содержания оксипролина в гомогенате ткани печени. Так, на 7 сутки после введения CCl4 наблюдается значительный подъем содержания оксипролина, что свидетельствует о деструктивных изменениях в ткани печени. У животных опытной группы в эти же сроки содержание оксипролина оставалось в пределах цифр группы интактных животных. Увеличение его содержания выявлено к 14 дню, однако оно было гораздо ниже, чем у животных контрольной группы. Снижение содержания оксипролина в гомогенате печени к 30 дню наблюдения происходило параллельно в обеих группах, причем у опытных животных оно нормализовалось. Следовательно, в ранние сроки наблюдения (до 7 дня) препарат оказывает защитное действие. Этот вывод согласуется с изменением содержания малонового диальдегида (МДА) гомогената ткани печени крыс. В то время как у контрольных животных было выявлено значительное накопление МДА к 7 дню наблюдения, у животных опытной группы в этот же период цифры были даже несколько ниже уровня группы интактных животных. К 14 дню отмечена выраженная тенденция к нормализации этого показателя в контрольной группе, в результате чего содержание МДА у животных всех групп существенно не отличалось.

Таким образом, введение гепатофила животным с токсическим гепатитом способствует улучшению показателей, характеризующих общую реакцию организма на введение гепатотропного яда и нормализует ряд биохимических показателей крови, отражающих функциональное состояние гепатобилиарной системы.

Предупреждение накопления МДА – конечного продукта перекисного окисления липидов – в гомогенате ткани печени под влиянием лечения гепатофилом позволяет предположить, что препарат обладает антиоксидантным действием, что может определять его защитное действие на клеточные мембраны гепатоцита.

1. Скакун Н.П., Дроговоз С.М. Обмен желчных кислот при экспериментальной дистрофии печени // Гастроэнтерол.: Респ. межвед. сб. – К., 1972. – Вып. 4.
2. Обоснование использования хорионического гонадотропина человека для регенерационной терапии хронических гепатитов / И.М. Солопаева, А.А. Волкова, Т.Ф. Жданова. и др. – Успехи гепатологии: Сб. научн. статей. – Рига: РМИ, 1982. – Вып. 10. – С. 433–448.

THE STUDY OF MEDICAL EFFICACY

OF DRUG “GASTROFIL”

Yu.A.Filippov, N.A.Domashneva 

SI «Institute of gastroenterology of Academy of

Medical Sciences of Ukraine» (Dnipropetrovsk)

The article presents the data about efficacy of drug gastrofil in experiment. Acute toxic hepatitis was created in write rats. Positive dynamics of biochemical indices was shown. The analysis of experimental data allowed that gastrofil had antioxidant activity.

Thus, experimental results showed positive effect after use of gastrofil at laboratory animals with experimental hepatitis